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当期目录

    2018年 第51卷 第24期 刊出日期:2018-12-16
      
    作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
    小麦转录因子基因TaWRKY33的耐盐性分析
    张惠媛,刘永伟,杨军峰,张双喜,于太飞,陈隽,陈明,周永斌,马有志,徐兆师,付金东
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4591-4602.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.001
    摘要 ( 224 )   HTML ( 74 )   PDF (2880KB) ( 260 )   收藏
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    目的 WRKY转录因子是植物转录调节因子家族之一,参与调控植物病原菌的防御、生长发育和抗逆应答等多种生理过程。小麦WRKY转录因子基因TaWRKY33可以提高转基因拟南芥对干旱和高温的抗性。通过分析TaWRKY33的耐盐性,检测TaWRKY33转录因子的转录活性,深入分析转录因子基因TaWRKY33的功能,以解析其耐盐调控机制。方法 以盐胁迫处理的小麦cDNA为模板,利用实时荧光定量PCR检测TaWRKY33在盐胁迫条件下的表达模式;将TaWRKY33的CDS序列插入带有CaMV35S启动子的pCAMBIA1302表达载体中,构建表达载体pCAMBIA1302- TaWRKY33,转入农杆菌,侵染野生型拟南芥获得转基因株系;同时利用pWMB110-TaWRKY33双元载体创建了过表达小麦株系。用转TaWRKY33的拟南芥和小麦进行耐盐性鉴定。构建诱饵载体pGBKT7-TaWRKY33,通过单转法将诱饵载体pGBKT7-TaWRKY33重组质粒和文库质粒逐步转化到酵母AH109感受态细胞。通过SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade和X-α-gal显蓝反应筛选得到阳性克隆,进行测序和BLAST分析。制备小麦原生质体,通过瞬时表达试验共转化报告子和效应子质粒,计算相对荧光值分析转录因子的转录活性。结果 实时荧光定量PCR结果显示,TaWRKY33受盐胁迫的诱导表达。双荧光素酶瞬时表达试验表明TaWRKY33在小麦细胞中可以激活相应荧光素酶的活性。从功能分析,在正常生长条件下转基因拟南芥和野生型拟南芥没有明显差异;在盐处理条件下,转基因拟南芥的根长大于野生型拟南芥的根长;过表达拟南芥的鲜重大于野生型,呈显著性差异。重要的是,在盐处理下,鲜重、相对电导率和Na +含量表明,过表达TaWRKY33的小麦较其受体对照有更好的耐盐性。对TaWRKY33候选互作蛋白分析表明,这些候选互作蛋白主要参与植物体的信号转导或免疫过程,表明TaWRKY33在植物的逆境信号转导、基因转录调控过程中发挥着重要作用。结论 小麦TaWRKY33受盐胁迫的诱导表达,具有潜在的转录激活活性,提高了转基因拟南芥和小麦的耐盐性;TaWRKY33可能需要其他蛋白共同作用提高小麦耐盐性。

    GT和GATA转录因子对甘蓝型油菜BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子功能的调控
    刘芳,肖钢,官春云
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4603-4614.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.002
    摘要 ( 78 )   HTML ( 21 )   PDF (3237KB) ( 97 )   收藏
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    目的 脂肪酸去饱和酶2基因(FAD2)是控制油菜中油酸含量的重要基因,通过研究GATA和GT转录因子与BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子的互作关系及其转录调控机制,为高油酸油菜育种提供分子理论基础。方法 通过缺失启动子片段及生物信息学分析,预测BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子区潜在顺式作用元件;从PlantTFDB转录因子数据库中筛选候选转录因子,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测转录因子的表达规律,并与BnA5.FAD2BnC5.FAD2表达规律对比,进一步筛选候选转录因子;利用酵母单杂交验证转录因子与启动子序列的互作情况;将转录因子与BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子序列共转入拟南芥,通过Western blot检测报告基因GFP的蛋白表达情况,分析转录因子对于启动子功能的影响。结果 单独敲除BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子中的GT或GATA顺式作用元件后,GFP蛋白丰度均下降,表明GT和GATA顺式作用元件在调节基因转录中起重要作用。酵母单杂交结果显示,GATA家族转录因子(Bna010243-1Bna026124-1Bna026124-2)和GT家族转录因子(Bna010915Bna013749)可以与BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子相互作用。Western blot结果显示,当GATA家族转录因子与含有GATA元件的启动子片段共转化拟南芥时,GFP蛋白含量明显高于无转录因子时,当敲除GATA元件时,GFP蛋白含量无明显变化;当GT家族转录因子与含有GT元件的启动子片段共转化拟南芥时,GFP蛋白含量有明显变化,当敲除GT元件时,GFP蛋白含量无明显变化。结论 GATA家族的转录因子Bna010243-1、Bna026124-1和Bna026124-2可以与BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子中GATA元件相互作用,增强基因的表达水平。GT家族的转录因子Bna010915可以与BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子中的GT元件发生互作,正向调节基因表达;Bna013749通过与BnA5.FAD2BnC5.FAD2启动子中的GT元件发生互作,负向调节基因表达。

    耕作栽培·生理生化·农业信息技术
    基于集中收获的新型棉花群体结构
    董合忠,张艳军,张冬梅,代建龙,张旺锋
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4615-4624.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.003
    摘要 ( 83 )   HTML ( 17 )   PDF (364KB) ( 154 )   收藏
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    构建合理群体结构是实现棉花高产优质高效的重要栽培学基础。我国传统棉花群体结构主要有“高密小株类型”、“中密中株类型”和“稀植大株类型”3种,分别在西北内陆棉区、黄河流域棉区和长江流域棉区广泛应用,为实现棉花高产稳产发挥了重要作用。但进入新时期,传统群体结构不利于集中收获和提质增效的弊端凸显,探索新型棉花群体结构成为新时期棉花栽培学的重要研究内容。本文简要评述了传统棉花群体结构的主要特征和弊端;基于新时期轻简节本、提质增效的需要,提出了建立“降密健株型”、“增密壮株型”和“直密矮株型”3种适于集中收获的新型棉花群体结构替代传统群体结构的观点。在此基础上,重点论述了3种新型群体结构的主要指标和调控技术,对新型棉花群体结构的研究与发展趋势进行了展望。

    长江流域直播油菜密植效应及其机理研究进展
    蒯婕,王积军,左青松,陈红琳,高建芹,汪波,周广生,傅廷栋
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4625-4632.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.004
    摘要 ( 106 )   HTML ( 32 )   PDF (370KB) ( 130 )   收藏
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    长江流域是我国油菜主产区,面积与总产均约占我国油菜总面积与总产的90%左右。但与发达国家相比,我国长江流域直播油菜长期存在着“密度低、单产低、机械化程度低、肥料用量高、人工成本高”的问题。“三低两高”的现状,导致油菜生产成本高,效益低,农户种植油菜积极性不高,面积与总产长期徘徊,阻碍了该产区油菜生产的发展。近年来,各地生产实践均表明,合理密植是提高我国长江流域直播油菜生产效益,提高农户种植油菜积极性,缩小与发达国家差距的一项核心技术。本文根据相关研究,综述了长江流域直播油菜适当增加种植密度后,油菜的籽粒产量、籽粒品质、茎秆抗倒性、角果抗裂角性、肥料利用效率、光能利用率以及菌核病、杂草发生的变化规律及其机理,提出了直播油菜“以密增产、以密补迟、以密省肥、以密控草、以密适机”的“五密”栽培技术,为建立适宜油菜机械化生产的高产抗倒油菜群体提供了理论依据,同时也为油菜绿色轻简高效生产提供了技术支撑。

    植物保护
    源于广8 A杂交稻组合的稻瘟病菌无毒基因型分析
    汪文娟,苏菁,杨健源,韦小燕,陈凯玲,陈珍,陈深,朱小源
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4633-4646.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.005
    摘要 ( 28 )   HTML ( 8 )   PDF (1317KB) ( 56 )   收藏
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    目的 分析源于广8 A杂交稻组合的稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)无毒基因型,为华南不同主栽抗病水稻品种的合理布局提供参考依据。 方法 利用抗稻瘟病单基因系,对稻瘟病菌单孢分离菌株进行致病型测定;并根据已克隆的且与稻瘟病菌致病性相关的8个无毒基因功能性分子标记进行分离菌株的无毒基因型分析。选取分离自广8 A杂交稻组合的27个稻瘟病菌单孢菌株,提取各菌株的菌丝体DNA作为模板,进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测。并对其中的7个稻瘟病菌菌株进行相应无毒基因全长或CDS区域的PCR产物测序,将测序序列与相应无毒菌株的无毒基因序列进行比较分析。 结果 所测定的菌株对其中的5个单基因系IRBLkh-K3(Pikh)、IRBLb-B(Pib)、IRBLz5-CA(Pi2)、NIL-e1(Pi50)和IRBL9-W(Pi9)表现高的无毒性频率(>85%),所有菌株对单基因系IRBL9-W(Pi9)和NIL-e1(Pi50)都表现无毒;这些菌株对其中的7个单基因系表现较低的无毒性频率(<20%),包括IRBLks-F5(Piks)、IRBLa-A(Pia)和IRBL19-A(Pi19)等,表明分离自广8 A杂交稻组合的稻瘟病菌对不同的单基因系表现出不同的致病型。所有菌株都被检测出含无毒基因AvrPi9AvrPik,并可检测到无毒基因AvrPik 的2种类型:AvrPik-D型和AvrPik-E型,但未检测出无毒基因Avr1-CO39AvrPiiAvrPia。在部分菌株中能检测到无毒基因AvrPiz-tAvrPibAvrPita预期大小的产物,但在所检测的菌株中均以较低的频率与不同的突变类型出现。对GD13-621、GD14-349与GD15-291等7个菌株分别进行相应无毒基因的PCR产物测序,AvrPi9AvrPitaAvrPiz-t的基因序列与其各自无毒菌株的无毒基因序列完全一致,表明分离菌株中这3个无毒基因的基因结构相对稳定。测序菌株的AvrPib基因序列与已报道的AvrPib无毒菌株的序列在基因的上游区域存在2个SNP的差异及3个连续碱基的插入,具有较丰富的多样性;6个测序菌株的AvrPik基因序列高度一致,仅在编码区存在1个SNP的差异即136(C/A),该位点SNP的变异导致氨基酸的错义突变46(H/N),表现为菌株携带AvrPik-D或AvrPik-E型。 结论 在华南主栽品种广8 A杂交稻组合上分离的稻瘟病菌中AvrPi9AvrPik分布较为广泛,在上述品种感病区域,可选用含Pi9Pik的抗病品种作为轮换种植。

    多主棒孢SdhB-H278R突变位点AS-real-time PCR 定量检测体系的建立
    孙炳学,石延霞,朱发娣,谢学文,柴阿丽,李宝聚
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4647-4658.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.006
    摘要 ( 34 )   HTML ( 4 )   PDF (1995KB) ( 50 )   收藏
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    目的 建立一种快速、高效、定量检测黄瓜多主棒孢(Corynespora cassiicola)琥珀酸脱氢酶B亚基(SdhB)H278R突变的实时荧光定量PCR(AS-real-time PCR)检测方法,并进行效果验证。方法 从北京市大兴区采集、分离纯化病原菌,获得24株多主棒孢的单孢菌株,采用菌丝生长速率法测定其对啶酰菌胺的EC50,随机选取4株敏感(S)和8株抗性(R)菌株测其菌丝生长速率、产孢量和致病性。采用引物对Cc-SdhB-F/R测定多主棒孢SdhB基因序列,检测SdhB的碱基变化。基于多主棒孢SdhB的相同核酸序列和SNP位点设计内参引物B-H278R-TY-F/R和特异性引物B-H278R-2F/2R14,建立并优化AS-real-time PCR定量检测体系,并对引物的特异性、熔解曲线和灵敏度进行评价。利用该体系分别检测含有H278R不同突变比例的DNA和孢子悬浮液。结果 测定的24个菌株中,敏感菌株占66.7%,EC50值为0.057—0.563 μg·mL -1;抗性菌株占33.3%,EC50值为5.395—11.710 μg·mL -1。抗性和敏感菌株仅在菌丝生长速率方面存在显著性差异,且菌丝生长速率与EC50之间存在显著负相关。在产孢量和致病性方面不存在显著性差异。测序分析发现抗性菌株均携带SdhB-H278R突变。本研究设计的引物B-H278R-2F和B-H278R-2F2R14特异性强,仅对多主棒孢SdhB-H278R突变菌株的DNA有扩增条带,对其余供试菌株均无条带扩增。普通AS-PCR检测的灵敏度为91 pg·μL -1, 而AS-real-time PCR的灵敏度可达9.1 pg·μL -1, 灵敏度为普通AS-PCR的10倍。以基因组DNA为标准品,构建的AS-real-time PCR标准曲线ΔCT值与相对模板浓度的对数有良好的线性关系,相关系数为0.9857, 扩增效率为92.59%。熔解曲线吸收峰单一,内参引物B-H278R-TY-F/R和特异性引物B-H278R-2F/2R14分别在87.81℃和91.62℃处出现单一特异性峰。用DNA和孢子悬浮液对标准曲线进行验证,结果表明随着相对模板浓度逐渐降低,该检测体系的准确性逐渐升高且检测下限为5%,同时预期值与试验值呈线性相关(R 2=0.9998和R 2=0.9922)。 结论 建立了一种高效、定量、快速的AS-real-time PCR检测体系用于SdhB-H278R突变位点的检测,可为杀菌剂的抗性治理提供理论依据。

    土壤肥料·节水灌溉·农业生态环境
    基于RF和SGT算法的子区优先建模对绿洲尺度 土壤盐度预测精度的影响
    王飞,杨胜天,魏阳,杨晓东,丁建丽
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4659-4676.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.007
    摘要 ( 32 )   HTML ( 4 )   PDF (11238KB) ( 40 )   收藏
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    目的 试图通过优先在干旱区绿洲的子区构建模型以提高绿洲全局土壤盐度的预测精度。同时量化全局模型和子区模型之间精度的差异性和不确定性。方法 利用随机森林(Random Forest,RF)和随机梯度增进算法(Stochastic Gradient Treeboost,SGT)定量化上述不确定性,同时,对比本地尺度多个情景(景观)优先建立模型再合并预测值对于模拟全局土壤盐度的精度影响。基于驱动因子(土地利用和地貌),响应因子(Normalized Difference Vegetation Index, NDVI和土壤电导率,EC),研究设计了27个能够相对覆盖典型绿洲不同土壤盐度变异性的环境情景。结果 70.37%(19/27)的情景证明SGT的预测精度高于RF。单独建模的10个情景的预测精度高于全局模型下10个再分类情景(根据情景设定规则将全局模型预测值再分类)的精度。特别是,EC≤4 dS·m -1 和 2 dS·m -1< EC<16 dS·m -1两个情景应该单独进行建模预测。4个情景(两两合并)预测值合并后的精度高于全局模型再分类后的精度。需要指出的是,用于绿洲尺度子区情景构建的首选分割变量是EC,其次是地貌和土地利用。结论 研究推荐基于SGT在绿洲内部不同景观尺度上优先建模,再将各景观尺度的预测值进行合并,以提高绿洲土壤盐度的推理精度。

    长期施肥对棕壤丛枝菌根真菌群落结构及其侵染的影响
    郭静,罗培宇,杨劲峰,李冬冬,黄月玥,韩晓日
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4677-4689.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.008
    摘要 ( 42 )   HTML ( 8 )   PDF (1063KB) ( 64 )   收藏
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    目的 丛枝菌根(Arbuscular mycorrhizal, AM)真菌有改善根际土壤环境、促进植物对养分的吸收、增强植物抗逆性和增加农作物产量等重要作用。本研究旨在探明长期施肥条件下玉米-大豆轮作棕壤丛枝菌根真菌群落结构、对玉米根系侵染的变化及其影响因素。方法 以沈阳农业大学棕壤肥料长期定位试验(38年)耕层(0—20 cm)土壤为材料,于2016年6月选取其中6个施肥处理:(1)不施肥处理(CK);(2)单施化学氮肥(N);(3)施用化学氮磷肥(NP);(4)施用化学氮磷钾肥(NPK);(5)单施有机肥(M);(6)有机肥和化学氮磷肥配施(MNP),采用PCR-DGGE、克隆测序及台盼蓝染色法,分析土壤和玉米根系定殖的AM真菌群落结构及侵染率,并结合环境因素进行冗余分析和典型对应分析。结果 施用有机肥处理土壤的碱解氮(AHN)、速效磷(AP)、速效钾(AK)、铵态氮(NH4 +-N)、硝态氮(NO3 --N)和可溶性有机碳(DOC)含量显著高于单施化肥和不施肥处理,且趋势为:有机肥处理>化肥处理>不施肥处理;与不施肥处理相比,单施化肥处理显著降低了土壤pH值,而施用有机肥处理显著提高了土壤pH值。通过PCR-DGGE及割胶测序,从土壤中得到AM真菌条带22条,根系AM真菌条带仅9条,共分离出13个OTU,从土壤样品中分离的AM真菌种群主要为球囊霉菌和巨孢囊霉属,而侵染玉米根系的AM真菌只有球囊霉菌。聚类分析表明长期不同施肥将棕壤中AM真菌分为了三大类群,分别为单施氮肥处理、施用有机肥处理和其他处理;根系AM真菌分为三大类群,第一类群NPK处理、第二类群为M处理和NP处理、第三类群为其他施肥处理。施用有机肥处理AM真菌的孢子密度显著高于单施化肥和不施肥处理,趋势为:有机肥处理﹥化肥处理﹥不施肥处理。各施肥处理AM真菌侵染率趋势为:NPK处理>施用有机肥处理>其他施肥处理。冗余分析结果表明棕壤AM真菌多样性与土壤理化性质无相关性,而孢子密度与土壤AHN、NH4 +-N、AP、AK、DOC及土壤含水量呈显著正相关;侵染率与土壤NO3 --N呈显著正相关;侵染率与孢子密度之间呈显著正相关;AM真菌的多样性与孢子密度和侵染率之间没有相关性。典型对应分析表明AHN、AK、DOC、 NH4 +-N 对AM真菌的群落组成影响显著。 结论 长期施肥通过改变土壤理化性质,从而对棕壤AM真菌的群落结构产生了显著影响,进而对AM真菌的侵染产生影响。

    园艺
    苹果MdMYB32通过自身EAR抑制序列抑制花青苷的生物合成
    许海峰,杨官显,王意程,姜生辉,王楠,陈学森
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4690-4699.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.009
    摘要 ( 33 )   HTML ( 0 )   PDF (2643KB) ( 57 )   收藏
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    目的 研究苹果MYB转录因子家族MdMYB32的生物学信息、表达水平及其在花青苷合成中的功能,旨在为进一步完善花青苷合成代谢机理提供参考。方法 以新疆红肉苹果杂种一代优系为试材,克隆MdMYB32,分析其进化树和蛋白序列;测定其在不同果实及在不同胁迫处理下的表达水平,通过转基因验证其在花青苷合成中的功能,并通过酵母单杂交分析其互作关系。结果 qRT-PCR分析表明MdMYB32在花青苷含量高的‘红脆9号’苹果中表达水平较低,而在花青苷含量低的‘红脆6号’苹果中表达水平较高,与花青苷含量呈负相关;且盐胁迫和冷胁迫均能抑制MdMYB32的表达;在进化上,MdMYB32AtMYB32,MdMYB16AtMYB4在同一个进化枝上,且MdMYB32蛋白序列在C端含有一个EAR抑制序列;在红肉愈伤中过表达MdMYB32能够抑制ANS的表达水平,降低花青苷含量,而过表达切除EAR抑制序列后的LESMdMYB32后,不能明显改变ANS的表达水平和花青苷含量;酵母单杂交和Chip-PCR分析表明MdMYB32和LESMdMYB32均能够结合ANS的启动子。结论 MdMYB32能够结合ANS启动子,并通过自身EAR抑制序列抑制花青苷的生物合成。

    尿素配施不同用量纳米碳对桃幼树生长及 氮素吸收利用的影响
    王国栋,肖元松,彭福田,张亚飞,郜怀峰,孙希武,贺月
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4700-4709.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.010
    摘要 ( 56 )   HTML ( 19 )   PDF (676KB) ( 123 )   收藏
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    目的 明确纳米碳对桃树生长的作用并筛选出纳米碳与尿素配施的最佳比例,为果树栽培过程中施用纳米碳材料及提高氮素肥效提供理论依据。方法 试验采用同位素示踪技术,以2年生‘瑞蟠21’/毛桃为试材,在盆栽条件下利用 15N尿素配施不同用量(设5个处理:CK:0,T1:5 mL,T2:10 mL,T3:15 mL,T4:20 mL)的纳米碳溶胶进行试验,探究纳米碳对土壤理化性状、桃树生长发育及氮素吸收利用的影响。测定盆土的pH、氧化还原电位、电导率,植株嫁接口上部2 cm处干径及植株各器官干重,叶片的叶绿素SPAD值、净光合速率,根系构型、植株各部分全氮含量及 15N丰度。 结果 施用纳米碳显著降低了土壤pH,提高了土壤氧化还原电位,影响了土壤溶液的氧化还原状态;土壤电导率随纳米碳用量的增加呈现处理前期降低后期增大的趋势。纳米碳的施用促进了桃幼树须根系的生长;显著提高了桃树叶片净光合速率、叶绿素含量及干径增量;桃幼树总物质积累量以T3处理最高,为778.0 g,比对照提高了28.4%。纳米碳的施用提高了桃树细根、粗根、侧枝、春梢叶等器官的Ndff值;与对照相比,T1处理显著提高了主干、中心干的氮素分配率,T3、T4处理降低了主干的氮素分配率;施用纳米碳对桃植株的氮素利用率均有显著提高,以T3处理的植株氮素利用率最高,为45.2%,比对照提高了66.5%;随纳米碳用量增加,土壤氮素残留率显著提高,T1、T2、T3、T4处理分别为对照的1.06、1.35、1.62和1.70倍,氮素损失率明显降低。结论 尿素配施纳米碳可改善土壤理化性状,有效吸附土壤中的氮素,显著降低氮素损失率,显著提高植株氮素利用率和土壤氮素残留率,促进桃树须根系的生长和植株形态建成。

    畜牧·兽医·资源昆虫
    5个基因在小尾寒羊和苏尼特羊性腺轴相关组织中表达分析
    张壮彪,狄冉,刘秋月,胡文萍,王翔宇,田志龙,张效生,张金龙,储明星
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4710-4719.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.011
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    背景 随着人们生活水平不断提高,蛋白含量丰富、胆固醇含量较少的羊肉在日常生活中越来越受青睐,羊肉总体消费需求呈逐年增长趋势。但是近年来以羊肉为主的羊产品短缺,导致羊肉的价格一直居高不下,造成羊肉供需之间的矛盾。在早期对绵羊各项生产性能研究中发现,其繁殖性能高低对羊肉生产有重要影响。因此,提高绵羊繁殖力对改变我国肉羊生产周转慢、效益差的局面有重要意义。产羔数是最重要的繁殖性状,但产羔数是一个低遗传力的数量性状,且受微效多基因的控制,故传统的育种方法难以快速改良产羔数性状。近年来随着分子标记技术的出现,研究人员发现了一些影响绵羊繁殖力的主效基因,比如BMPR1BBMP15、GDF9等,所以后期人们开始利用常规育种结合这些分子标记进行高繁殖力绵羊品种选育。研究表明除了这些已经发现的主效基因外,仍有一些基因对绵羊的繁殖力具有一定的调控作用。目的 探究影响绵羊繁殖力的候选基因BMP2BMP6BMP7CASTCART在小尾寒羊和苏尼特羊性腺轴相关组织(大脑、小脑、下丘脑、垂体、子宫、卵巢、输卵管)的表达差异,为阐明绵羊高繁殖力机理提供参考。方法 以产多羔的小尾寒羊和产单羔的苏尼特羊为对象,利用实时荧光定量PCR检测上述5个基因在两个绵羊品种与性腺轴相关的7种组织中的表达差异。结果 BMP2在小尾寒羊和苏尼特羊的性腺轴7种组织中均有表达,在小尾寒羊下丘脑中的表达量高于苏尼特羊(P<0.05),在小尾寒羊输卵管、卵巢、垂体、小脑的表达量高于苏尼特羊(P<0.01),但该基因在2种绵羊的大脑和子宫中表达量差异并不显著(P>0.05);BMP6在小尾寒羊垂体和卵巢以及输卵管中表达量高于苏尼特羊(P<0.01),虽然该基因在小尾寒羊的下丘脑、子宫中的表达量高于苏尼特羊,但其表达差异并不显著(P>0.05);BMP7在小尾寒羊垂体、大脑的表达量高于苏尼特羊(P<0.05),在小尾寒羊下丘脑、输卵管、卵巢中的表达量高于苏尼特羊(P<0.01),但该基因在小尾寒羊和苏尼特羊的小脑和子宫中表达量差异并不显著(P>0.05);CAST在小尾寒羊和苏尼特羊的下丘脑、垂体中呈痕量表达,在其它组织中均有较高表达量,其在小尾寒羊输卵管和子宫中的表达量高于苏尼特羊(P<0.01),但在小尾寒羊和苏尼特羊大脑中的表达量几乎相同(P>0.05);CART在2种绵羊下丘脑中有较高表达量,在苏尼特羊垂体中的表达量高于小尾寒羊(P<0.05),在小尾寒羊大脑中的表达量高于苏尼特羊(P<0.01),而该基因在2种绵羊其它组织中的表达量差异并不显著(P>0.05)。结论 暗示这5个基因可能对绵羊繁殖力具有一定的调控作用。

    不同湿度对肉鸡生长性能、抗氧化能力和免疫功能的影响
    孙永波,王亚,萨仁娜,张宏福
    中国农业科学. 2018, 51(24):  4720-4728.  doi:10.3864/j.issn.0578-1752.2018.24.012
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    目的 通过模拟高、中、低三种湿度旨在研究舍内不同湿度对肉鸡生长性能、抗氧化能力以及免疫功能的影响,为舍内湿度环境的合理调控提供数据支持,促进肉鸡健康养殖的发展。 方法 采用单因素完全随机设计,选用1日龄健康、体重相近的AA肉公雏270只,随机分成3组:正常湿度组(对照组,60% RH)、低湿组(30% RH)和高湿组(90% RH),每组设6个重复,每个重复15只。试验于2016年2—4月在动物营养学国家重点实验室昌平基地的人工气候舱内进行,舱内配置湿度传感器,24h连续监测舱内湿度,并根据实时监测值进行湿度调节。试验期为42d,1—21日龄为试验前期,22—42日龄为试验后期。肉鸡采用平养笼饲养,自由采食和饮水,24h光照。按照AA肉鸡饲养手册进行日常管理,按照常规程序进行免疫接种。分别在肉鸡21、42日龄时,以重复为单位测定生产性能,同时从每个重复中选取体重相近的 2只肉鸡进行翅静脉采血,然后屠宰,测定血清抗氧化指标和细胞因子含量以及肉鸡的脏器指数。 结果 (1)生长性能:与正常湿度的对照组相比,低湿处理显著降低21日龄和42日龄肉鸡体重(P<0.05),以及平均日增重(P<0.05),而高湿处理组均无显著差异(P>0.05)。(2)抗氧化能力:在肉鸡21日龄和42日龄,低湿组肉鸡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)显著低于正常湿度对照组(P<0.05)。在肉鸡42日龄时,低湿组肉鸡血清丙二醛(MDA)显著高于对照组(P<0.05);高湿组血清总抗氧化能力(T-AOC)显著低于对照组(P<0.05)。(3)免疫功能:与对照组相比,高湿处理显著升高21日龄肉鸡血清促炎细胞因子IFN-γ和TNF-α含量(P<0.05),而湿度对42日龄肉鸡血清细胞因子含量均无显著影响(P>0.05)。(4)脏器指数:高湿组42日龄肉鸡肺脏指数显著低于对照组(P<0.05)。此外,低湿组42日龄肝脏指数显著大于高湿组(P<0.05)。 结论 长期低湿和高湿环境能够降低肉鸡的生长性能、抗氧化能力和免疫功能,不利于肉鸡的健康生长。在肉鸡养殖过程中通过加湿或除湿及时调节舍内湿度环境,促进肉鸡健康生长。