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当期目录

    2011年 第44卷 第6期 刊出日期:2011-03-15
      
    作物遗传育种·种质资源·分子遗传学
    小麦籽粒异淀粉酶聚合体的结构及酶学性质
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1077-1084 . 
    摘要 ( 606 )   PDF (584KB) ( 764 )   收藏
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    【目的】阐明小麦淀粉去分支酶(Debranching enzyme, DBE)的结构和酶学特性,为品质改良提供理论依据。【方法】以小麦品种糯麦2号为材料,利用硫酸铵分级沉淀、超滤、阴离子交换柱层析和葡聚糖凝胶层析法对异淀粉酶(Isoamylase, ISA)同工酶聚合体进行分离纯化,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)和SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对ISA聚合体的结构和组成成分进行分析。【结果】小麦籽粒胚乳中异淀粉酶(ISA)形成2种不同聚合体,即ISA1同源四聚体和由4个ISA1与1个ISA2组成的异源五聚体,分子量分别约为320 kD和380 kD。ISA1同源四聚体的最适催化温度为30℃,40℃处理10 min后完全失去活性;ISA1/ISA2异源五聚体的最适温度为35℃,50℃处理10 min后仍有50%的活性。纯化后的ISA1和ISA2进行Native-PAGE检测证明,ISA2单独存在没有催化活性,将ISA2加入到ISA1中可检测到与ISA1/ISA2异源聚合体相同的ISA活性。【结论】小麦胚乳中存在2种形式的ISA多亚基聚合体;在40℃和50℃高温条件下,ISA1/ISA2异源聚合体的热稳定性高于ISA1同源聚合体;ISA2可显著增强ISA1聚合体的酶活性,可能在支链淀粉合成中起关键作用。

    基于GISH的甘蔗与蔗茅属间杂交F1后代染色体组成及核型分析
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1085-1091 . 
    摘要 ( 718 )   PDF (1354KB) ( 692 )   收藏
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    【目的】探讨甘蔗(Saccharum spp.)与蔗茅(Erianthus fulvus)杂交F1材料的染色体组成及核型差异。【方法】以甘蔗与蔗茅间杂交所获得的16份F1材料为研究对象进行单色及双色基因组原位杂交(genomic in situ hybridization,GISH)研究,在GISH的基础上对3份材料的中期染色体进行核型分析。【结果】GISH的研究结果表明,子代材料中具有7—10条不等的父本染色体;由于母本遗传物质对父本遗传物质的排斥作用引起的染色体消减及片段化导致父本染色体在子代中有断裂的现象;研究结果表明,在间期核中亲本染色质以分散的方式单独分布;3份材料的中期染色体进行核型分析的公式分别为2n=92=80m(4SAT)+12sm、2n=88=82m+6sm及2n=88=78m(2SAT)+10sm,核型分类为2C、2C和2B。【结论】甘蔗×蔗茅杂种F1的染色体组成为n+n及2n+n,它们的核型均为较原始的染色体类型。

    枯萎病菌诱导香蕉根的均一化全长cDNA文库构建及防御基因的表达模式分析
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1092-1099 . 
    摘要 ( 865 )   PDF (716KB) ( 696 )   收藏
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    【目的】研究防御基因表达模式,筛选抗枯萎病候选基因,进一步阐明抗病机制。【方法】以4号枯萎病生理小种诱导的‘农科1号’香蕉为试材,利用DSN(duplex-specific nuclease)均一化酶结合SMART(switching mechanism at 5′end of the RNA transcript)技术构建香蕉根的均一化全长cDNA文库;并用多重半定量RT-PCR技术研究防御基因的表达模式。【结果】经检测,文库滴度为3.1×106 cfu•mL-1,扩增后库容为2.8×108 cfu•mL-1。随机挑选580个克隆进行测序,去除低质量序列后获得421个unigenes,片段分布在750—3 000 bp,文库重组率为100%,其中,未知功能基因占42%,全长cDNA序列为68%。文库筛选获得7个防御基因,进行不同时间的诱导表达分析,发现苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化氢酶(CAT)、β-1,3-葡聚糖酶(PR-2)和胶质乙酰酯酶(PAE)具有较低的本底表达水平;枯萎病菌浸染后,7个防御酶基因表达量增加,过氧化物酶(POX)、几丁质酶(PR-3)、PAE和PAL在第6天达到高峰;虽然7个防御基因在对照植株中的表达模式与诱导后的植株类似,但表达量均显著低于接菌后。【结论】所构建的均一化全长cDNA文库,片段重组性和完整性均达到分离筛选目的基因高质量文库的要求,且证明了7个防御基因不同程度地参与了抗枯萎病反应。

    耕作栽培·生理生化·农业信息技术
    FACE条件下O3浓度增高对小麦产量和籽粒充实的影响
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1100-1108 . 
    摘要 ( 728 )   PDF (372KB) ( 451 )   收藏
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    【目的】探讨近地层大气O3浓度增高对小麦生产的影响。【方法】2007—2009年度应用FACE研究平台,以O3自然浓度(A-O3)为对照,设计O3浓度增高50% (E-O3)进行对比试验,采用烟农19、扬麦16、嘉兴002、扬麦15和扬辐麦2号等5个品种为对象,研究大气O3浓度增高50%对不同基因型小麦品种籽粒产量及其构成因素的影响。【结果】O3浓度增高显著降低小麦籽粒产量,降幅为10.10%—34.51%,平均为19.74%,品种、年度间存在显著或极显著差异。O3浓度增高条件下千粒重降低17.88%(10.16%—29.47%);每穗粒数下降3.47%(-1.53%—11.90%),但穗数平均较对照增加0.95%(-14.58%—23.74%),处理、品种和年度间存在显著或极显著差异。O3浓度增高50%使籽粒长、宽、厚和籽粒体积分别减小0—4.16%、7.95%—20.24%、2.66%—11.00%和8.5%—31.5%;皱缩指数增大0.23%—36.66%,籽粒灌浆速率降低,籽粒充实度变化为-21.40%—3.76%,最终导致粒重降低。【结论】FACE条件下O3浓度增高使籽粒灌浆物质来源不足,籽粒库容变小,充实度降低,粒重变小,最终导致小麦籽粒产量下降。

    玉米近缘种大刍草(Zea luxurians)光周期敏感性与育种利用
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1109-1116 . 
    摘要 ( 972 )   PDF (342KB) ( 802 )   收藏
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    【目的】探索大刍草短日照敏感苗龄和最佳日照时数,使其与栽培玉米花期相遇,通过杂交导入有利性状进行玉米品种改良与种质资源创新。【方法】设置苗龄和日照时数两个处理,以自然光照为对照,研究不同短日照处理后不同苗龄大刍草的生长发育情况;自制酶液,测定各处理的过氧化物酶(POD)活性,并对其同工酶进行电泳分析;利用诱导开花的大刍草与玉米自交系授粉杂交、回交并自交选育新自交系。【结果】19—26 d是大刍草能否接受诱导的临界苗龄,苗龄(5—47 d)越大诱导效果越好;9 h是诱导生殖生长的最佳日照时数;各日照时数处理的POD活性随苗龄的增大呈现一定的规律性变化,但不能直接反映大刍草生长发育状况;a、b、c、d四条POD酶带是大刍草处于营养生长阶段的标记,e、f、g三条POD酶带的出现表明进入生殖生长阶段,POD酶的相对含量主导着大刍草的生长发育方向;采用40—47 d苗龄每日9 h短日照处理的大刍草与玉米掖478、综31花期相遇,通过远缘杂交育成NX3153等玉米自交系。【结论】在中国北方可以通过短日照处理诱导大刍草幼苗提前开花,与普通玉米花期相遇,通过远缘杂交实现基因导入,创新玉米种质。

    杂交棉干物质积累与养分吸收分配特点
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1117-1124 . 
    摘要 ( 689 )   PDF (229KB) ( 552 )   收藏
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    【目的】研究杂交棉干物质积累与养分吸收及分配特点,为结合棉花生育特性制定高产施肥措施提供理论依据。【方法】以杂交棉标杂A1、新陆早43号为试验材料,常规棉新陆早13号为对照,单因素随机区组设计大田试验,结合室内常规分析方法测定植株干物质和氮、磷、钾含量。【结果】标杂A1和新陆早43号在整个生育期内植株干物质积累量较对照品种新陆早13号高20.6%、15.5%,吸氮量高16.1%、10.5%,吸磷量高16.4%、11.4%,吸钾量高21.0%、18.5%;蕾、花、铃的干物质积累量较对照高20.7%、15.4%,吸氮量高16.9%、10.7%,吸磷量高18.1%、11.5%,吸钾量高20.7%、18.3%。2个杂交棉品种干物质和养分在叶片中的分配全生育期一直高于对照,在茎中的分配前中期高于对照,在蕾、花、铃中的分配在后期高于对照。生育后期杂交棉茎、叶的养分吸收速率低于对照,蕾、花、铃则高于对照。【结论】2个杂交棉品种的干物质积累和养分吸收量均大于常规棉且差异显著。本试验条件下,标杂A1和新陆早43号在生育期内氮吸收量为302.7和288.1 kg•hm-2,磷吸收量(P2O5)为138.2和132.3 kg•hm-2,钾吸收量(K2O)为459.2和449.7 kg•hm-2。

    植物保护
    苹果轮纹病菌种内遗传多样性研究
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1125-1135 . 
    摘要 ( 857 )   PDF (613KB) ( 602 )   收藏
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    【目的】分析苹果轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana)的遗传多样性并确认其优势类群。【方法】对采集分离的64个菌株进行形态特征和致病性测定,对部分菌株的进行了ITS序列测序,采用ISSR分析这些菌株的遗传多样性。【结果】通过形态特征和致病性明确了所分离的64个菌株是苹果轮纹病菌。17个菌株ITS序列与贝格伦葡萄座腔菌(Botryosphaeria berengeriana de Not f. sp. piricola(Nose) Koganezawa et Sakuma)的序列一致,并且被分成两个类型H1和H2。用13条ISSR引物从64个菌株中扩增出121条条带,其中88条多态性条带,多态性比率为72%。64个菌株的遗传相似性从0.44到0.99,并且被分成2个ISSR类群,类群1包含21个菌株、类群2包含43个菌株。【结论】本研究中贝格伦葡萄座腔菌的遗传多样性与菌株的地域、症状以及分离部位没有相关性。苹果轮纹病菌被分成2个ISSR类群,类群2是优势类群。

    大草蛉幼虫对烟粉虱的捕食功能反应及捕食行为观察
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1136-1145 . 
    摘要 ( 559 )   PDF (439KB) ( 660 )   收藏
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    【目的】评估大草蛉(Chrysopa pallens)对烟粉虱(Bemisia tabaci)卵、若虫及伪蛹的搜寻、控害潜能,观察分析其捕食行为。【方法】在室内设置不同密度的烟粉虱卵、若虫及成虫供大草蛉高龄幼虫取食,统计大草蛉3龄幼虫在不同猎物密度下的净取食和取食比例,并进行相关统计分析。观察大草蛉3龄幼虫的取食行为的若干独立行为事件,系统描述其行为事件内容,分析研究各行为发生频次及持续时间占总捕食过程的比例。【结果】大草蛉3龄幼虫对烟粉虱卵、若虫及伪蛹的捕食功能反应均同时拟合Holling II及III型方程。在室内条件下,大草蛉3龄幼虫的捕食量随猎物密度的增加而上升,其瞬间攻击率随烟粉虱虫龄的增加而增大,且处理时间为若虫>伪蛹>卵,最佳寻找密度为若虫最低。对搜寻效应的估计结果表明,大草蛉幼虫对烟粉虱的搜寻效应随烟粉虱虫龄的增加而升高。大草蛉取食卵及若虫时,其行走及搜索行为所占比例相当,而取食伪蛹时搜索行为所占比例最高而取食其次。同时,在捕食过程中,各行为事件的发生比例也存在显著差异。【结论】大草蛉高龄幼虫在低密度下对烟粉虱卵、若虫及成虫的捕食能力随密度增长且不受密度制约,其捕食行为事件的发生频次及持续时间在取食不同类型猎物时差异显著。

    斜纹夜蛾核型多角体病毒基因ⅡORF13的克隆、表达与启动子活性分析
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1146-1153 . 
    摘要 ( 499 )   PDF (537KB) ( 473 )   收藏
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    【目的】研究新发现的斜纹夜蛾核型多角体病毒II株基因 ORF13的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV II ORF13基因序列设计引物,经PCR扩增并克隆ORF13。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF13片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,起始密码子上游-84bp处发现杆状病毒晚期启动子基序ATAAG,没有发现明显的早期启动子基序。启动子活性分析和转录时相分析证实,ORF13是一个早期和晚期都表达的基因,在病毒感染2 h就开始转录,18 h达到最高峰,24 h以后转录水平有所下降,但基本维持恒定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1:3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF13是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。ORF13编码的蛋白可能是一种BV的膜蛋白,与细胞跨膜转运有关,制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。

    土壤肥料·节水灌溉·农业生态环境
    县域尺度表层土壤质地空间变异与因素分析
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1154-1164 . 
    摘要 ( 838 )   PDF (1173KB) ( 651 )   收藏
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    【目的】以北京市平谷区为研究区域,采用传统统计和地统计学相结合的方法研究县域尺度下土壤质地空间变异的规律,探究土壤质地空间变异的机理。【方法】采用Levine’s方法进行方差奇次性检验,根据检验结果选取最小显著性差方法(least-significant difference,LSD)对土壤颗粒组成与高程、母质、土地利用和水域分布关系进行研究。空间预测采用普通克里格法,鉴于土壤质地属于成分数据,插值前对原始数据进行对称对数比转换。【结果】不同高程组、母质类型、土地利用类型及水域缓冲区组各颗粒平均含量存在一定的差异性,不同高程组和母质类型的土壤颗粒组成之间的差异性比不同土地利用类型和水域缓冲区明显。总体而言,研究区内随着海拔高度的降低,土壤颗粒呈现由粗变细的趋势;由石英含量较高的酸性岩母质发育的土壤土壤颗粒较粗;菜地土壤颗粒相对较细;随着离水域距离的增大,土壤砂粒含量呈增加趋势。地统计分析结果显示,土壤质地各颗粒表现出极强的空间自相关性,空间变异主要由结构性因素引起。各颗粒空间插值结果表明,土壤各颗粒组成空间分布总体趋势特征比较明显。【结论】传统统计分析和地统计学相结合的方法能够系统和全面地揭示土壤质地空间变异的确定性和随机性,研究区土壤质地空间格局主要受地形、母质等自然因素影响。经过对称对数比转换后,土壤质地各颗粒组成空间预测结果满足成分数据空间插值的要求。

    纳米Fe3O4对红壤微生物数量、酶活性及2,4-D降解的影响
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1165-1172 . 
    摘要 ( 623 )   PDF (495KB) ( 502 )   收藏
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    【目的】从磁致效应的角度考察纳米四氧化三铁(Fe3O4)对红壤微生物数量和酶活性的影响,研究纳米Fe3O4处理对红壤中2,4-D的降解效果,为纳米磁处理技术用于污染土壤修复提供依据。【方法】采用不同剂量的纳米Fe3O4处理红壤,用稀释平板法和化学比色法测定处理前后微生物数量和酶活性的变化;利用高效液相色谱(HPLC)测定土壤中2,4-D浓度的变化。【结果】纳米Fe3O4对细菌和放线菌有激活效应,但对真菌存在抑制作用,且当纳米Fe3O4投加量为80 g•kg-1时磁致效应最显著;同样,纳米Fe3O4对淀粉酶、脲酶、中性磷酸酶和过氧化氢酶也具有激活效应,但对不同酶活性的影响程度存在差异;经纳米Fe3O4处理后红壤中2,4-D的降解率明显高于未处理组,7 d内2,4-D的降解率可达84%。【结论】纳米Fe3O4处理后红壤中的微生物数量和酶活性显著增加,且红壤对2,4-D的降解能力明显增强。

    园艺
    苹果自交不亲和基因型(S基因)研究进展
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1173-1183 . 
    摘要 ( 824 )   PDF (338KB) ( 769 )   收藏
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    苹果是蔷薇科一个典型的配子体自交不亲和果树树种。本文详细介绍了苹果S等位基因研究现状,系统介绍了基于PCR技术的苹果S 基因型鉴定的理论基础和主要方法,列出了迄今国内外应用这些方法鉴定出的500多个苹果品种的S 基因型。本文对于苹果品种授粉树的合理配置和杂交育种亲和性亲本选择具有重要的指导意义。
    黄土沟壑区王东沟流域苹果品质限制性生态因子探析
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1184-1190 . 
    摘要 ( 691 )   PDF (399KB) ( 509 )   收藏
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    【目的】找出限制苹果品质进一步提高的生态因子,以最大化地实现系统内自然资源的可持续利用。【方法】以黄土沟壑区的典型代表王东沟流域为研究区,借助主成分分析法和多因素模糊综合评价对该流域苹果生长的生态适宜度进行综合量化评价。【结果】王东沟流域苹果生态适宜度综合效益指数达到0.74,属于中上等水平,从理论上量化了黄土沟壑区为中国优质苹果的适生区;并指出影响该流域苹果品质的生态因子中,土壤全氮和有机质含量的隶属度值最低,分别为0.34和0.35,其次是年降水量,其隶属度值也仅为0.62,而年均温、≥10℃年积温、1月中旬均温、夏季(6—9月)温度日较差、土壤有效磷、有效钾等生态因子的隶属度值均较高,条件较优。【结论】黄土沟壑区王东沟流域苹果品质的限制性生态因子为土壤全氮和有机质含量及年降水量,从调控该流域苹果园的肥、水资源入手,将有助于促进黄土沟壑区苹果品质的稳步提高。

    一品红生物量及对水分、养分吸收利用的变化规律
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1191-1200 . 
    摘要 ( 700 )   PDF (294KB) ( 536 )   收藏
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    【目的】降低盆花生产成本和提高水肥利用率,实现一品红盆花生产的精准控制。【方法】利用方程回归的方法研究一品红在不同发育阶段对水分和养分的吸收和利用状况。【结果】一品红的生物量累计、水分累计吸收量以及对养分的累计吸收量随栽培时间的变化均符合S型曲线,用Logistic模型y=1/(a+be-x)回归,得到的方程决定系数均大于0.99。一品红的生物量累计速率、水分生产效率和养分吸收速率随栽培时间呈右偏斜钟形变化。【结论】建立了一品红在生长发育的不同时期适宜的浇水频率和施肥量方案:一品红栽培31—53 d在基质含水量为65.09%时浇水;54—93 d在基质含水量为66.83%时浇水;93 d以后在基质含水量为64.34%时浇水,浇水量为500.00 mL/盆。栽培31—58 d的施肥量为794.68—808.59 mg/盆;59—107 d的施肥量为827.15—833.33 mg/盆;107 d以后的施肥量为831.01—833.33 mg/盆,每周施肥1次。这一结果为实现一品红节能、优质、高效盆花生产的精准水肥控制提供了技术支持。

    百合杂交种及亲本耐热性比较
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1201-1209 . 
    摘要 ( 561 )   PDF (562KB) ( 495 )   收藏
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    【目的】分析比较百合杂交种及亲本耐热性,筛选优良的耐热性育种材料。【方法】以离体扩繁的细叶百合(承德种源)ב西伯利亚’杂交种与细叶百合(大庆种源)ב西伯利亚’杂交种及其亲本为试验材料,测定其经过不同温度(25 ℃、28 ℃、31 ℃、34 ℃、37 ℃、40 ℃)处理后抗性生理指标及电阻抗图谱参数之间的变化规律。【结果】31 ℃处理后,杂交种与亲本叶绿素含量及根系活力极显著上升并达到峰值,杂交种介于亲本之间或优于亲本,两个指标呈显著相关(P<0.01);37 ℃处理时,两杂交种游离脯氨酸显著下降至最低(P<0.05),杂交种积累量高于亲本;34 ℃处理时,m显著上升并达到峰值,相对电导率显著下降,杂交种均优于父本,两指标呈显著相关(P<0.05)。【结论】细叶百合大庆种源较承德种源耐热性强,且以细叶百合大庆种源作母本比以细叶百合承德种源作母本的杂交优势明显;杂交种耐热性与母本相近,但明显优于父本。

    贮藏·保鲜·加工
    质构仪穿刺试验检测冬枣质地品质方法的建立
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1210-1217 . 
    摘要 ( 1070 )   PDF (378KB) ( 555 )   收藏
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    【目的】丰富鲜食枣果实品质评价的内容,为合理指导生产、建立标准化、统一化的鲜食枣果实质地评价方法提供理论依据和技术手段。【方法】采用质构仪质地整果穿刺法进行试验,通过对不同来源的冬枣进行质地检测、Macro程序编辑和测得数据的方差分析,建立一套适合鲜食枣果实的质地检测方法。【结果】主要试验参数为:采用完整的冬枣为试验对象,每果取最大横径处阴阳面2个部位测定(取平均值),各样品随机取20个(以上)果实进行测定;采用P/2n针状探头(直径2 mm),测前速度5 mm•s-1,贯入速度1 mm•s-1,测后速度5 mm•s-1,最小感知力5 g,穿刺深度小于最小样品的果肉厚度(冬枣,5 mm),感应力阈值2 g;通过设定的Macro程序,可在所得演示曲线中得到:果皮强度(g)、果皮破裂深度(mm)、果皮脆性(g•s-1)、果皮韧性(g×s)、果肉最大硬度(g)、果肉平均硬度(g)和果肉匀质指数等参数。【结论】该方法能够检测出不同生产园、不同含水量和不同贮藏时间冬枣的质地差异,同样适用于其它鲜食枣品种以及其它带皮食用的小型水果的质地分析。

    金华火腿副产品酶解物的MRPs抗氧化活性
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1218-1223 . 
    摘要 ( 744 )   PDF (326KB) ( 541 )   收藏
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    【目的】分析金华火腿副产品酶解物的组成,研究其美拉德反应产物(MRPs)的抗氧化活性。【方法】采用反相高效液相色谱对酶解物的氨基酸组成进行测定,高效凝胶过滤色谱分析相对分子质量分布情况。通过与葡萄糖、木糖进行反应制备MRPs,经体外试验评定MRPs的抗氧化活性。【结果】酶解物中游离氨基酸占5.52%,总氨基酸中必需氨基酸含量为21.68%;酶解物主要由相对分子质量180—500 D的成分组成。随着反应时间的延长,金华火腿副产品酶解物的MRPs颜色不断加深,DPPH自由基清除率与还原力均呈上升趋势。酶解物与木糖的反应速度相对较快;在反应90 min时,DPPH自由基清除率与还原力显著高于与葡萄糖的反应产物,抗氧化活性更强。【结论】金华火腿副产品酶解物具有较高的营养价值,主要由2—4肽构成,与葡萄糖、木糖反应所得的MRPs均具有一定的DPPH自由基清除能力和还原力。

    畜牧·资源昆虫
    猪早期孤雌胚组蛋白乙酰化与组蛋白去乙酰化酶基因mRNA表达水平相关性研究
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1224-1231 . 
    摘要 ( 882 )   PDF (429KB) ( 588 )   收藏
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    【目的】 探讨猪孤雌胚早期发育过程中组蛋白H4K5乙酰化水平与组蛋白去乙酰化酶(HDAC1)基因mRNA表达水平之间的关系。【方法】收集早期猪孤雌胚(2-细胞、4-细胞、桑椹胚和囊胚),运用细胞免疫组化和激光共聚焦显微镜,通过检测这些胚胎的相对荧光强度来评判其H4K5的乙酰化水平;运用实时定量PCR的方法检测猪早期孤雌胚发育过程中HDAC1基因mRNA表达的动态变化。【结果】从2-细胞到囊胚开始,其H4K5的乙酰化均在细胞核内表达,且各阶段表达量逐步提高,至囊胚期达最高(分别为1124.77±127.78、1305.81±184.23、1795.19±318.67及2149.63±529.47),差异显著(P<0.05);从2-细胞到囊胚,其HDAC1基因 mRNA表达逐步降低(分别为1.00±0、0.91±0.009、0.85±0.008及0.67±0.006),各阶段差异显著(P<0.05)。【结论】从2-细胞到囊胚,其H4K5的乙酰化水平与HDAC1基因mRNA表达水平之间呈负相关。

    超数排卵效果不同绵羊卵巢卵泡促卵泡素受体的分布
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1232-1238 . 
    摘要 ( 793 )   PDF (477KB) ( 571 )   收藏
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    【目的】探讨在具有不同超数排卵效果的绵羊品种中,进行超排处理后其卵巢上促卵泡素受体(FSH receptor,FSHR)的分布情况,为进一步研究二者的相关性及据此改进超排效果奠定基础。【方法】根据超数排卵效果优劣依次选择3个中国地方品种的绵羊:小尾寒羊、白滩羊和乌珠穆沁羊。在常规超排最后一次注射FSH后的8、16和24 h分别各取3只绵羊的卵巢,并采用免疫组织化学法观察3种绵羊卵巢上FSHR的分布情况。【结果】FSHR主要分布于3个品种绵羊卵巢的颗粒细胞上;小尾寒羊最后一次注射FSH后8、16和24 h的各时期卵泡中FSHR的表达都显著高于另外两个品种绵羊(P<0.05),在早期卵泡和中期卵泡中,白滩羊的FSHR表达量也高于乌珠穆沁羊;3个品种绵羊在最后一次注射FSH后第8、16、24小时,其晚期卵泡FSHR表达阳性率都显著高于各自相应的早期和中期卵泡(P<0.05)。【结论】推测出3个不同地方品种绵羊的卵巢对FSH处理的敏感性应该依次为:小尾寒羊>白滩羊>乌珠穆沁羊,表明绵羊超数排卵效果与其卵巢上FSH受体分布存在一定联系。

    湖羊排卵相关基因表达水平与繁殖性能关系的研究
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1239-1246 . 
    摘要 ( 589 )   PDF (633KB) ( 603 )   收藏
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    【目的】研究湖羊卵巢组织COX2、HAS2、TSG6和PTX3的mRNA表达水平与湖羊繁殖性能的相关性,筛选影响湖羊高产的候选基因,为揭示湖羊高繁多胎分子遗传机理提供依据。【方法】选取16只经产湖羊母羊,分为低产组和高产组,于发情后24—36 h屠宰,应用RT-PCR技术检测COX2、HAS2、TSG6和PTX3的组织表达特征,进一步利用实时荧光定量PCR技术分析各基因mRNA在低产组和高产组湖羊卵巢组织中的表达差异。【结果】COX2、HAS2、TSG6和PTX3均在湖羊卵巢组织中表达,在卵巢组织,高产组TSG6和PTX3的mRNA表达极显著高于低产组(P<0.01),低产组HAS2的mRNA表达极显著高于高产组(P<0.01),而COX2的mRNA表达在高产组和低产组间无显著差异(P>0.05)。【结论】HAS2、TSG6和PTX3的mRNA表达在高产组和低产组间差异极显著,可能与湖羊繁殖性能相关,可作为影响湖羊高产的候选基因。

    蜜蜂球囊菌几种胞外蛋白酶的特性
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1247-1254 . 
    摘要 ( 781 )   PDF (324KB) ( 607 )   收藏
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    【目的】研究由蜜蜂球囊菌引起的真菌性疾病白垩病的侵染机制,以及蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性。【方法】利用人工合成的培养基,在体外诱导蜜蜂球囊菌分泌胞外蛋白酶,用硫酸铵沉淀和透析,获得初酶液,利用相应的底物对酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶、弹性蛋白酶和胰蛋白酶的活力进行测定。【结果】蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶主要有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶3种,无弹性蛋白酶和胰蛋白酶。对这3种酶的最适温度、pH值以及热稳定性和酸碱稳定性进行了测定。这3种胞外酶的最适反应温度都在40℃左右,最适pH为7左右,均不耐高温,热稳定性差,在中性的pH环境下比较稳定。【结论】蜜蜂球囊菌可以分泌多种胞外蛋白酶,它们的最适pH和温度与蜜蜂消化道内的环境一致。

    兽医
    线虫线粒体基因组全序列分析研究进展
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1255-1265 . 
    摘要 ( 801 )   PDF (533KB) ( 838 )   收藏
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    线虫(nematode)种类繁多,生活方式多样,一部分线虫可寄生于动物和植物体内,引起线虫病(nematodiasis),其中旋毛虫病、猪蛔虫病等是重要的人兽共患寄生虫病,在中国和世界各地普遍流行,危害严重。本文将对线虫线粒体基因组的研究进展、应用和今后发展方向做一简要综述。迄今,已完成46种线虫的线粒体基因组全序列测定和分析。线虫线粒体基因组的碱基组成、基因结构、基因变异等方面有其特点,这些分析结果为线形动物门线粒体功能基因组学研究、比较基因组学研究、分子分类学研究、虫种(株)鉴定与分类、分子系统发育和进化分析等提供了重要依据和指导作用,为线虫病诊断、分子流行病学调查等分子检测方法的建立提供参考依据。

    芦丁对去卵巢处女大鼠乳腺发育作用的影响
    郭旭东,刁其玉,王月影,屠焰,闫贵龙,付彤,汪新建,邓凯东,张乃锋,鞠翠芳,李军涛,宋凯,顾小卫,吕宗友,徐俊
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1266-1276 . 
    摘要 ( 791 )   PDF (521KB) ( 559 )   收藏
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    【目的】通过考察芦丁对去卵巢处女大鼠内分泌激素水平、激素受体表达的影响以及乳腺组织形态学的观察,来研究芦丁促进乳腺发育的类雌激素样作用。【方法】试验选择32只去卵巢处女Wistar大鼠,随机分为四个处理组,假手术Sham组,每日每只灌胃生理盐水(2 mL)一次;卵巢切除Ovx组,每日每只灌胃生理盐水(2 mL)一次;芦丁Ovx+Rut组,每日每只灌服芦丁(60mg•kg-1BW)一次;雌二醇Ovx+Est组,每周每只肌注雌二醇(60µg•kg-1BW)一次。试验为期两周,试验结束后采集大鼠血液样品、乳腺组织样品等,运用放免技术检测血浆和乳腺组织中雌激素(E2)、催乳素(PRL)、生长激素(GH)的含量,RT-PCR技术检测乳腺组织这些激素受体的表达量,并进行乳腺组织形态学观察。【结果】试验结果显示,大鼠血浆中E2的水平,Ovx+Rut组和Ovx+Est组高于Ovx组(P<0.05),该两组间差异不显著(P>0.05),Ovx+Rut组水平低于Sham组(P<0.05),Ovx+Est组与Sham组差异不显著(P>0.05),乳腺组织中E2含量呈现相同规律;PRL在血浆与乳腺组织中的含量都表现为Ovx组<Ovx+Rut组<Ovx+Est组<Sham组(P<0.05),血浆中GH的含量Ovx组低于Ovx+Rut组低于Ovx+Est组低于Sham组(P<0.05),在乳腺组织GH含量,Ovx组低于Ovx+Rut组和Ovx+Est组(P<0.05),Ovx+Rut组低于Sham组(P<0.05),Ovx+Rut组和Ovx+Est组间差异不显著(P>0.05),Ovx+Est组与Sham组差异不显著(P>0.05);大鼠乳腺组织中雌激素受体ER、催乳素受体PRLR、生长激素受体GHR在Ovx组、Ovx+Rut组、Ovx+Est组、Sham组组间数值依次增大(P<0.05),表现相同变化趋势;乳腺组织形态学观察发现,Ovx+Rut组、Ovx+Est组、Sham组乳腺组织的发育显著好与Ovx组(P<0.05)。【结论】芦丁能够提高去卵巢处女大鼠E2水平,促进PRL、GH分泌,上调乳腺组织中ER、PRLR、GHR的表达量。
    农业经济与管理
    合同生产模式与农户有机肥施用行为 ——基于山东省348户苹果种植户的调查数据
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1277-1282 . 
    摘要 ( 587 )   PDF (245KB) ( 593 )   收藏
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    【目的】有机肥投入不足将加剧土壤营养失衡和基础肥力下降,严重威胁农业和农村经济的可持续发展,如何采取措施引导农户增施有机肥已成为中国农业可持续发展的关键。本研究的目的就是评价合同生产模式对农户有机肥行为的影响。【方法】利用山东省苹果种植户实地调查数据,实证分析合同生产模式对农户有机肥施用行为的影响及其作用机理。【结果】销售合同、生产合同、果园离家距离、果园规模、农户有机肥认知程度、家庭非农收入比重与农户有机肥施用量之间呈显著正相关,化肥施用量、家庭劳动力数量与农户有机肥施用量之间呈显著负相关。【结论】在其它条件不变的情况下,农户与合作社签订销售合同和生产合同分别可以使其增施有机肥约678元/hm2和1 497元/hm2;此外,果园离家距离、果园规模、农户有机肥认知程度、家庭劳动力数量和非农收入比重也是影响农户有机肥施用行为的重要因素。

    研究简报
    小麦兰考矮早八茎蘖幼穗激素差异及其密度调控效应
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1283-1291 . 
    摘要 ( 706 )   PDF (258KB) ( 526 )   收藏
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    【目的】探讨大穗型小麦品种兰考矮早八主茎和两分蘖间幼穗部激素差异与分蘖成穗的关系及其密度调控效应。【方法】在大田条件下,设置150(D1)、262.5(D2)和375万株/hm2(D3)3个种植密度,在拔节期取标记株区分主茎、分蘖Ⅰ和分蘖Ⅱ,显微镜下剥取幼穗液氮保存,用酶联免疫法测定幼穗中赤霉素(GAs)、吲哚乙酸(IAA)、分裂素(ZR)和脱落酸(ABA)含量。【结果】小花分化期主茎与分蘖幼穗分化进程差异很小,之后差距增大,表现为主茎幼穗分化进程要快于两分蘖。在分蘖两极分化过程中,幼穗中GAs、IAA和ZR含量及其IAA/ABA和ZR/ABA比值表现为主茎>分蘖Ⅰ>分蘖Ⅱ,在拔节后期幼穗ABA含量表现为分蘖Ⅱ>分蘖Ⅰ>主茎,IAA/ZR较高或呈升高趋势时对分蘖生长产生抑制作用。【结论】分蘖幼穗中较高的GAs、IAA、ZR含量以及IAA/ABA和ZR/ABA比值有利于幼穗生长发育,而较高的ABA含量及IAA/ZR比值不利于分蘖成活。分蘖与主茎差距越大,分蘖衰亡时间越早,且密度对其具有显著的调控效应。

    大麦EcoTILLING技术体系的优化
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1292-1300 . 
    摘要 ( 623 )   PDF (1151KB) ( 535 )   收藏
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    【目的】建立适合于大麦的EcoTILLING技术体系,用于鉴定大麦目的基因或特定区域的自然突变。【方法】利用M13通用接头作荧光标记,采用巢式PCR对大麦目的基因进行扩增,从PCR扩增的退火温度及模板量、CELⅠ的用量和酶切处理时间等方面对大麦EcoTILLING技术体系进行了优化。【结果】用于第一次PCR扩增(10 μL反应体系)的大麦基因组DNA模板最佳用量为20 ng,第一次PCR扩增产物稀释3倍后作为第二次PCR扩增的模板,2次PCR扩增的适宜退火温度均为58℃;在20 μL CELⅠ酶切体系中,最适酶量为0.4 μL(3 U•μL-1),45℃条件下最佳酶切处理时间为17.5 min。【结论】优化的EcoTILLING技术体系能有效地发现大麦自然群体中特定区域的DNA多态性,降低了试验成本,为在大麦及其它作物上的广泛应用提供借鉴。

    脐橙果皮油斑病解剖结构
    中国农业科学. 2011, 44(6):  1301-1306 . 
    摘要 ( 603 )   PDF (427KB) ( 564 )   收藏
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    【目的】通过对重庆奉节两个脐橙品种果皮油斑病两种处理下不同发病时期的调查和解剖结构的观察,比较涂蜡和套袋两种措施对油斑病的影响,探索油斑病发病的解剖学机理及预防措施。【方法】采用塑料切片技术,经过JB-4渗透、包埋,玻璃刀切片,PAS-TBO双重染色,显微镜观察、测定表皮细胞、组织结构特性。【结果】脐橙油胞分布在外果皮中,健康和发病初期油胞基本上保持其完整性而不发生破裂;发病晚期,破裂开口。油斑病的发生程度与果皮角质膜质地是否均匀一致有关;角质膜厚度的差异不是油斑病发生的直接原因。涂蜡的果皮质地均匀、外表光滑,保鲜效果好,但对油斑病的发生影响较小;套袋果感染其它病的机会较少,而且质地均匀、外表光滑,果皮的角质层较完整。【结论】强光照、外界压力、表皮外带水分、机械损伤都会增加油斑病的发生;套袋有助于降低油斑病发生。